本书针对生物化学及研究中涉及的生物大分子--蛋白质、酶、核酸，根据生物大分子理化性质，结合实用的电泳技术、层析技术、离心技术、分子克隆技术等，综合系统地介绍了生物大分子的分离纯化含量测定分析鉴定，并结合教学中物质代谢、酶促反应动力学的系统分析，设计实验并融入相关实验技术和新进展，使学生在实验教学中掌握知识、技能的同时，体会对科研方法的选择与评价。
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目录
第一章生物化学常用分析技术1
第一节生物大分子的基本制备技术1
第二节分光光度法6
第三节层析技术15
第四节电泳技术24
第二章蛋白质分子组成与理化性质分析37
第一节蛋白质的分子组成与结构37
第二节蛋白质的分离和纯化38
第三节蛋白质的定量38
第四节蛋白质相对分子量测定41
第五节实验项目42
实验一蛋白质的定量测定42
实验二血清蛋白质的层析分离45
实验三血清蛋白质的电泳分离48
实验四蛋白质理化性质分析52
实验五固定化蛋白质的免疫生化鉴定（Western Blot）56
第三章核酸的分子组成及理化性质分析58
第一节核酸的分子组成与结构58
第二节核酸的理化性质59
第三节核酸的制备和含量测定60
第四节实验项目61
实验六真核生物基因组DNA的制备（苯酚法）61
实验七人外周血白细胞DNA的制备62
实验八DNA与RNA含量测定63
实验九琼脂糖凝胶电泳分离DNA63
第四章酶作用及酶促反应动力学65
第一节酶的分子结构和功能65
第二节酶促反应动力学65
第三节酶活性测定69
第四节实验项目70
实验十淀粉酶的特异性及温度、pH对淀粉酶活性的影响70
实验十一碱性磷酸酶的提纯及比活性的测定73
实验十二碱性磷酸酶的Km测定77
实验十三磷酸盐对碱性磷酸酶的抑制作用78
实验十四温度和pH对碱性磷酸酶活性的影响79
实验十五乳酸脱氢酶同工酶分析81
第五章物质代谢及其激素调节83
第一节物质代谢定义83
第二节物质代谢的研究方法83
第三节实验项目85
实验十六血清葡萄糖的测定85
实验十七胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响87
实验十八肝糖原的提取和鉴定89
实验十九生物氧化中酶的催化作用90
实验二十血浆高密度脂蛋白-胆固醇含量的测定92
实验二十一磷脂的提取及其薄板层析94
实验二十二酮体的生成与作用95
实验二十三血清丙氨酸转氨酶活性的测定（改良赖氏法）97
实验二十四纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用99
第六章分子生物学基本实验技术102
第一节基因工程基本技术102
第二节聚合酶链反应108
第三节核酸分子杂交111
第四节DNA测序技术113
第五节实验项目115
实验二十五动物组织总RNA的提取115
实验二十六聚合酶链反应（PCR）技术体外扩增DNA116
实验二十七逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）117
实验二十八 质粒DNA的制备118
实验二十九限制性内切酶酶切122
实验三十目的DNA片段的分离和纯化123
实验三十一DNA片段与载体的连接124
实验三十二感受态细菌的制备（化学法）126
实验三十三质粒DNA的转化127
实验三十四重组质粒的筛选128
实验三十五Southern blot（印迹）129
实验三十六外源基因的原核表达131
实验三十七外源基因在真核生物中的表达132
附录134
附录一常用缓冲溶液的配制134
附录二常用蛋白质相对分子质量及等电点137
附录三色谱法常用数据139
附录四离心转数和离心力的换算141
附录五实验数据和数据处理142
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