微生物生理学实验教程_关国华主编_9787030443366

《微生物生理学实验教程》共4章，30个实验。主要介绍研究微生物细胞化学成分、微生物细胞结构、微生物代谢与微生物代谢调控的实验技术和方法。《微生物生理学实验教程》选取的实验材料包括细菌、古菌、丝状真菌和酵母菌，生理类型包括白养型、异养型及光能营养型，实验技术则融合了微生物学、生物化学、遗传学、生物物理学、分子生物学、生物信息学等学科的研究技术和方法，力求综合分析和探讨微生物生命活动规律。《微生物生理学实验教程》选编的实验力求体现教材的基础性、代表性、实用性和先进性。《微生物生理学实验教程》对每个实验的实验原珥都作了较详细的论述，实验步骤清晰，每个实验都有思考题和参考文献。

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第一章微生物细胞化学成分的分析
微生物细胞化学成分的分析是研究微生物生命活动的基础。本章介绍分析微生物细胞化学组成的方法，包括微生物细胞含水量、蛋白质、核糖核酸、糖类含量的则定方法，反映细菌细胞内氧化还原水平n勺辅酶I和辅酶II浓度的检测方法，极端耆盐菌细胞膜的独特成分甘汕二醚类的分析技术和次级代谢产物虾青素的提取及则定。
实验一细菌细胞含水量与蛋白质含量的测定
一、实验目的
1．掌握测定细菌细胞干重及含水量的原理及方法。
2．了解几种常用的测定蛋H质含量i向方法，掌握福林一酚法和考马斯亮蓝染色法测定细菌细胞蛋白质含最的原理及实验技术。
二、实验原理
（一）细菌细胞干重和含水量的测定
在液体培养基中培养的微生物细胞，经过滤或离心收集斤，洗涤除去附在细胞表面的培养基，再离心收集细胞，≥i：尽量除去细胞所附着的水分，称得的质量为细抱的鲜重(wet weight)，常以g/L表示。为了防止细胞吸水涨裂，洗涤细胞常用与细抱基本等渗的缓冲液。由于细胞在收集过程中会聚集成团，细胞之问的水分难以除去，冈此，用上述方法测得的细胞鲜重常常比实际的鲜重要高（一般高出10%左右）。弛胞之问的水分可用加入同位素标记蛋白质测定，由蛋白质不能进入细胞，只能溶于细胞外围的水中，因此测定细胞团的放射活性，可推算出细胞外围的水量。
取一定量的鲜细胞，105～110℃干燥16 --24 h后称量，再重复儿次，称至恒重，得到细胞的干重（dry weight）。微生物细胞f向干重就是微生物的生物量(biomass)，是测量微生物生长的重要指标，常用每升含有微生物的质量（单位g/L）表示。105～110℃足以挥发掉大分子通过水合作用所结合的水，更高的温度会引起某些大分子的玻坏并导致一些细胞其他成分的挥发。此外，高温也会引起细胞悬液沸腾，将物质溅出容器，而使结果偏低。

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