全国高等职业教育园林园艺专业精品系列教材：植物组织培养_袁学军，王志勇编_9787303132539

《全国高等职业教育园林园艺专业精品系列教材：植物组织培养》植物组织培养技术不仅具有遗传性状相对稳定、增殖快、繁殖系数大、产量高、品质好、生产周期短等特点，而且受气候、季节影响小，又便于操作，可节省大量人力、物力，已成为生物科学中重要的研究技术和手段之一，推广应用前景广阔。我国农业正从传统农业走向现代农业，作为现代生物技术的基础和重要组成之一的植物组织培养技术有力地推动了我国农业现代化进程，社会对植物组织培养人才的需求也越来越大。为适应这种农业人才需求形势的变化，各职业学校在种植类专业中陆续开设了植物组织培养这门实用性很强的技术课程。为此，我们吸纳国内外最新研究成果和企业先进实用技术，从组织培养岗位的要求出发，根据生源的特点和人才培养方向，本着突出职业能力培养、强调理论应用、科学性与实用性相结合和有利于教学的原则编写了此教材。

    九、脱毒和病毒检测
    1.病毒与危害
    第一种类型为曾经或正在大面积或高比率发生，并造成严重为害的植原体病害，主要包括枣疯病和泡桐丛枝病；
    第二种类型为局部或零星发生病害类型，山楂丛枝病严重地区占20％左右。桃树黄化病和红叶病的发生面积较大；
    第三种类型为国内外引种或国内苗木调运而传人病害类型，比较典型的为从以色列引进的樱桃扁枝病和黄化病。1995年北京中以示范农场从以色列引进一年生的经嫁接的6个欧洲樱桃品系的苗木3500株，栽植当年即发现患带化病苗木，1995～1996年的发病率为3％。在从国内其他地区引入的樱桃、枣树、泡桐等新品种苗木上也都发现带病苗木。
    2.脱毒方法
    植物的病毒除豆类等一部分作物外，种子均不传染病毒，而营养繁殖的植物病毒病的蔓延日益显著，几乎遍布所有所有这类植物。病毒的粒子极其微小，只有在电子显微镜下才能确定，防治极其困难。自20世纪50年代发现用组织培养可以脱除病毒以来，现已在生产上广泛应用。
    （1）茎尖脱毒原理
    感染病毒植株体内的病毒分布并不均匀，病毒的数量随植株的年龄与部位而异，越靠近茎顶端区域的病毒的浓度也越低，分生区域内无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞的不断分裂和活跃的生长速度，所以生长点含有的病毒数量极少，几乎检测不出病毒，因此剪切的茎尖越小越佳，但太小时不易成活，过大则不能保证完全除去病毒，不同种类植物和不同种类病毒在茎尖培养时切取的茎尖大小也不相同。方法：在解剖镜下，一手用镊子夹住无菌的茎尖，一手用锋利的无菌刀逐层剥去生长点周围的叶片，直到达到晶莹发亮的光滑圆顶为止，根据不同目的可取带2～3个叶原基的茎尖或大一点的带2～3片幼叶的茎尖。到底多大的生长点才合适，当然越小越好，比如用0.1mm以下的生长点，去病毒的效果就较好，但成活率低并且由于体积太小，常常使得培养时间延长到一年，甚至会更长，这不但历时过长而且也增加了转换培养基时材料污染的机会。一般说来，根据病毒种类不同切取0.1～1.0mm大小的生长点就可以去掉病毒。大部分都是切取0.2～0.5mm带1～2个叶原基的茎尖为培养材料。
    （2）高温脱毒原理
    植物组织处于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。但每种植物都有其临界温度范围，超过这一临界范围或在此范围内处理时间过长，都会导致寄主植物组织受伤。为此可使用变温的处理方法，高（40℃）和低温（16℃～20℃）交替处理，既能保证植物材料不受伤害，又能除去病毒。①温汤浸渍处理：适用于休眠器官、剪下的接穗或种植的材料，在50℃左右的温水中浸渍数分至数小时，方法简便易行但易致使材料受伤。②热风处理：将生长的盆栽植株移入温热治疗（箱）室内，处理温度和时间因植物种类和器官的生理条件而异，一般在35℃～40℃，短则几十分钟长可达数月。
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